Masz problemy z hodowlami komórkowymi?

REBEL może Ci pomóc

Pani która pracuje na maszynie

System REBEL służy optymalizacji hodowli, sprawdzeniu składu mediów hodowlanych, które różnią się między dostawcami, a nawet seriami tego samego producenta, co wpływa na jakość produkcji i funkcjonowanie komórek. Skąd pomysł, aby sprawdzać jak odżywiają się komórki, jaki ma to wpływ na produkcję i czy na pewno producenci mediów dostarczają, to co deklarują?

Czy kiedykolwiek sprawdzali Państwo media od swojego dostawcy i skład mediów w trakcie hodowli? Czy próbowali Państwo odtworzyć eksperyment i nie wyszedł taki sam. A może czasami zastanawiali się Państwo dlaczego linia komórkowa rośnie lepiej z użyciem mediów jednego dostawcy, w porównaniu do mediów dostarczanych przez innego?

Jak pokazały powyższe zestawienia, to co jest w Państwa mediach ma znaczenie. W szczególności, że różnice w składach między dostawcami bywają bardzo znaczące. Zatem ważne jest zrozumienie, że wydajność, jakość, produktywność, a także zwiększenie wydajności opracowywanych procesów ma znaczenie. Zgodność mediów jest czymś, co możemy uznać za coś oczywistego, ale już możliwość łatwego sprawdzenia i porównania pożywek od różnych dostawców lub wybrania najlepszych pożywek dla Państwa komórek już nie, a może ona naprawdę przyczynić się do zmniejszenia opóźnień w hodowli spowodowanych skutkami wyczerpania lub nadmiernej ilości składnika odżywczego, a ostatecznie do wzrostu jej jakości.

 

Czy częste i terminowe pomiary krytycznych komponentów nie zapewniłyby optymalnej i stałej wydajności praz jakości?

Pomiar krytycznych składników w pożywkach, podczas całego przebiegu bioprocesu, pomaga poinformować o stosownych zmianach w podłożu podstawowym lub zasilającym, które należy uzupełniać lub wzmacniać, jeśli ich stężenie jest krytycznie niskie.

 

Czy nie warto zatem sprawdzać mediów za każdym razem, zanim jeszcze uruchomią Państwo bioreaktor lub rozpoczną hodowlę?

Odpowiedź wydaje się być jasna Jak najłatwiej to sprawdzić? Wystarczy sięgnąć po naszego "buntownika", który od strony technologicznej jest połączeniem elektroforezy kapilarnej ze spektrometrem masowym w mikroskali, co pozwala na szybkie (7 min/próbkę) i sprawne oznaczenie poniższych 32 analitów:

Kłopoty z hodowlami komórkowymi? Część 2

Wystarczy w prosty i szybki sposób przygotować próbki i wykonać pomiar, co pokazuje poniższy schemat i mieć wynik nawet w 7 minut. Pozwala to uniknąć pracochłonnego i czasochłonnego przygotowania próbek do wysyłki (filtracja, opisywanie, mrożenie, pakowanie), a w dalszej kolejności przygotowywania próbek do analizy, a finalnie uzyskania ostatecznie raportu, co trwać może nawet 2-3 tygodnie.

Potrzebne są tylko:

Materiał: media z hodowli bakteryjnych lub ssaczych, ale też z fermentacji Objętość: minimalna objętość próbki wynosi tylko 10 µl (przed rozcieńczeniem)
Format próbki: płytka 96-dołkowa lub fiolka chromatograficzna
Odczynniki: do obsługi urządzenia potrzebny jest zestaw, który zawiera niezbędny elektrolit, rozpuszczalnik, wzorce, płytki i chip.
Taki jeden zestaw wystarcza, aby dokonać analizy 200 próbek.

Kłopoty z hodowlami komórkowymi? Część 2

Korzyści płynące z wykorzystania systemu REBEL

  • Szybki dostęp do wszystkich pomiarów Twoich mediów komórkowych
  • Uzyskujesz pewność, że Twoje media są spójne/mają ten sam skład
  • Uzyskujesz wyniki z najmniejszych objętości Twoich próbek - 10 µl
  • Monitorujesz składniki odżywcze mediów komórkowych w czasie rzeczywistym
  • Uzyskujesz szybsze zakończenie projektu
  • Poprawiasz wydajność dzięki przeprowadzaniu wewnętrznych testów w mniej niż 10minut, bez konieczności wysyłania próbek do zewnętrznego laboratorium
 

REBEL w liczbach

czyli zbiór ciekawostek
<10min

czas analizy

Analiza jednego dołka zajmuje mniej niż 10 minut
10µL

objętość próbki

Do przeprowadzenia badania wystarczy mała ilość próbki
>30

liczba analitów

REBEL pozwala na badanie ponad trzydziestu równych analitów (aminokwasy i witaminy)
96

format próbek

możliwość korzystania z płytek 96-dołkowych lub z fiolek chromatograficznych
 

Chcesz poznać więcej szczegółów?

Pobierz broszurę (EN)
 

Źródła:

  1. Xu, J., Rehmann, M.S., Xu, M. et al. Development of an intensi ied fed-batch production platform with doubled titers using N-1 perfusion seed for cell culture manufacturing. Bioresour. Bioprocess. 7, 17 (2020). https://doi.org/10.1186/s40643-020-00304-y
  2. Morris, C., Polanco, A., Yongky, A. et al. Bigdata analytics identi ies metabolic inhibitors and promoters for productivity improvement and optimization of monoclonal antibody (mAb) production process. Bioresour. Bioprocess. 7, 31 (2020). https:// doi.org/10.1186/s40643-020-00318-6
  3. Saba Ghassemi, Francisco J. Martinez-Becerra, Alyssa M. Master, Sarah A. Richman, David Heo, John Leferovich, Yitao Tu, Juan Carlos García-Cañaveras, Asma Ayari, Yinan Lu, Ai Wang, Joshua Rabinowitz, Michael C. Milone, Carl H. June, Roddy S. O’Connor, Enhancing Chimeric Antigen Receptor T Cell Anti-tumor Function through Advanced Media Design, Molecular Therapy -Methods & Clinical Development, Volume 18, 2020, Pages 595-606, ISSN 2329-0501. https://doi.org/10.1016/j.omtm.2020.07.008
  4. Andrew R. Medvec, Christopher Ecker, Hong Kong, Emily A. Winters, Joshua Glover, Angel Varela-Rohena, James L. Riley, Improved Expansion and In Vivo Function of Patient T Cells by a Serum-free Medium, Molecular Therapy - Methods & Clinical Development, Volume 8, 65 - 74 https://doi.org/10.1016/j.omtm.2017.11.001
  5. Kumar, J, Chauhan, AS, Shah, RL, Gupta, JA, Rathore, AS. Amino acid supplementation for enhancing recombinant protein production in E. coli. Biotechnology and Bioengineering. 2020; 117: 2420– 2433. https://doi.org/10.1002/bit.27371
  6. Fan, Y., Jimenez Del Val, I., Müller, C., Wagtberg Sen, J., Rasmussen, S.K., Kontoravdi, C., Weilguny, D. and Andersen, M.R.(2015), Amino acid and glucose metabolism in fed-batch CHO cell culture affects antibody production and glycosylation. Biotechnol. Bioeng., 112: 521-535. https://doi.org/10.1002/bit.25450
  7. Roger Geiger, Jan C. Rieckmann, Tobias Wolf, Camilla Basso, Yuehan Feng, Tobias Fuhrer, Maria Kogadeeva, Paola Picotti, Felix Meissner, Matthias Mann, Nicola Zamboni, Federica allusto, Antonio Lanzavecchia (2016), L-Arginine Modulates T Cell Metabolism and Enhances Survival and Anti-tumor Activity, Cell, Volume 167, Issue 3, 829 - 842.e13, https://doi.org/10.1016/j.cell.2016.09.031
  8. Morris, C., Polanco, A., Yongky, A. et al. Bigdata analytics identi ies metabolic inhibitors and promoters for productivity improvement and optimization of monoclonal antibody (mAb) production process. Bioresour. Bioprocess. 7, 31 (2020). https:// doi.org/10.1186/s40643-020-00318-6
  9. H. Edward Wong, Chung-Jr Huang, Zhongqi Zhang, Amino acid misincorporation in recombinant proteins, Biotechnology Advances, Volume 36, Issue 1, 2018, Pages 168-181, ISSN 0734-9750, https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2017.10.006
  10. Fratz-Berilla, EJ, Faison, T, Kohnhorst, CL, et al. Impacts of intentional mycoplasma contamination on CHO cell bioreactor cultures. Biotechnology and Bioengineering. 2019; 116: 3242–3252. https://doi.org/10.1002/bit.27161
  11. Chen, Y., McConnell, B.O., Gayatri Dhara, V. et al. An unconventional uptake rate objective function approach enhances applicability of genome-scale models for mammalian cells. npj Syst Biol Appl 5, 25 (2019). https://doi.org/10.1038/s41540-019-0103-6

Powiązane wpisy: